表皮生长因子偶联牛血清白蛋白纳米粒荷载紫杉醇的制备及鉴定

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.52.006

中国组织工程研究 ›› 2014, Vol. 18 ›› Issue (52): 8393-8398.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.2014.52.006

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表皮生长因子偶联牛血清白蛋白纳米粒荷载紫杉醇的制备及鉴定

王树斌^1，2，袁飞²，彭志平³，李少林³，武云^1，2，朱巍^1，2

¹包头市中心医院肿瘤科，内蒙古自治区包头市 014040；²包头医学院肿瘤防治研究所，内蒙古自治区包头市 014040；³重庆医科大学放射医学教研室，重庆市 400016

修回日期:2014-11-18 出版日期:2014-12-17 发布日期:2014-12-17
通讯作者: 李少林，国家二级教授，博士生导师，重庆医科大学放射医学教研室，重庆市 400016
作者简介:王树斌，男，1980年生，内蒙古自治区巴彦淖尔市人，2008年重庆医科大学毕业，硕士，主治医师，主要从事肿瘤的放射治疗和肿瘤分子生物学研究。
基金资助:
国家自然科学基金(30070230，30424005)

Preparation and identification of epidermal growth factor coupling bovine serum albumin nanoparticles loading paclitaxel

Wang Shu-bin^{1, 2}, Yuan Fei², Peng Zhi-ping³, Li Shao-lin³, Wu Yun^{1, 2}, Zhu Wei^{1, 2}

¹Department of Oncology, the Center Hospital of Baotou City, Baotou 014040, Inner Mongolia Autonomous Region, China; ²Cancer Research Institute of Baotou Medical College, Baotou 014040, Inner Mongolia Autonomous Region, China; ³Department of Radiology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China

Revised:2014-11-18 Online:2014-12-17 Published:2014-12-17
Contact: Li Shao-lin, Professor, Doctoral supervisor, Department of Radiology, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China
About author:Wang Shu-bin, Master, Attending physician, Department of Oncology, the Center Hospital of Baotou City, Baotou 014040, Inner Mongolia Autonomous Region, China; Cancer Research Institute of Baotou Medical College, Baotou 014040, Inner Mongolia Autonomous Region, China
Supported by:
the National Natural Science Foundation of China, No. 30070230, 30424005

摘要/Abstract

摘要：

背景：紫杉醇是临床常用的广谱抗肿瘤植物药，但其不良反应较多，因此迫切需要合适的载体以减小紫杉醇本身的毒性，同时达到更好的靶向性。

目的：研究表皮生长因子偶联牛血清白蛋白纳米粒荷载紫杉醇的制备及其理化性质的鉴定。

方法：采用超声乳化和溶剂挥发技术制备白蛋白纳米粒，通过化学交联试剂将表皮生长因子与白蛋白纳米粒偶联，制得表皮生长因子偶联白蛋白纳米粒，使用表皮生长因子偶联白蛋白纳米粒荷载¹²⁵I标记紫杉醇，作为实验样品。在白蛋白纳米粒与表皮生长因子偶联白蛋白纳米粒中分别加入100，200，400，800 mg/L的 ¹²⁵I标记紫杉醇，进行包封率和载药量检测；检测实验样品、荷载¹²⁵I标记紫杉醇白蛋白纳米粒的药物释放率；检测实验样品、荷载¹²⁵I标记紫杉醇白蛋白纳米粒与¹²⁵I标记紫杉醇的室温稳定性及血清稳定性。

结果与结论：荷载¹²⁵I标记紫杉醇的白蛋白纳米粒组和实验样品组的包封率和载药量随着紫杉醇药量的增加，包封率呈现下降趋势，载药量呈现上升趋势。实验样品、荷载¹²⁵I标记紫杉醇白蛋白纳米粒释药趋势基本相同，表现为包载药物缓慢释放。实验样品、荷载¹²⁵I标记紫杉醇白蛋白纳米粒的室温稳定性与血清稳定性均高于¹²⁵I标记紫杉醇(P < 0.05)。表明表皮生长因子偶联白蛋白纳米粒荷载紫杉醇具有良好的载药率、释药率和稳定性。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

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关键词: 生物材料, 纳米生物材料, 牛血清白蛋白, 纳米微粒, 紫杉醇, 表皮生长因子, 国家自然科学基金

Abstract:

BACKGROUND: Paclitaxel is a broad-spectrum antitumor plant drug commonly used, possessing much adverse reactions. Therefore, there is an urgent need for an appropriate carrier to reduce the toxicity of paclitaxel, and achieve better targeting.

OBJECTIVE: To explore the preparation of epidermal growth factor (EGF) coupling bovine serum albumin nanoparticles loading paclitaxel and its physical and chemical properties.

METHODS: Albumin nanoparticles were prepared by phacoemulsification and solvent evaporation technology, and EGF was coupled with albumin nanoparticles by chemical crosslinking reagents. The EGF coupling albumin nanoparticles loading ¹²⁵I marked paclitaxel acted as experimental samples. 100, 200, 400, 800 mg/L ¹²⁵I marked paclitaxel was added to albumin nanoparticles and EGF coupling albumin nanoparticles respectively for detection of encapsulation efficiency and loading rate. The drug releasing rate of samples and albumin nanoparticles loading ¹²⁵I marked paclitaxel were measured. The stability at room temperature and serum stability of samples, albumin nanoparticles loading ¹²⁵I marked paclitaxel and ¹²⁵I marked paclitaxel were detected.

RESULTS AND CONCLUSION: With the increasing of paclitaxel dosage, in albumin nanoparticles loading ¹²⁵I marked paclitaxel group and experimental sample group, the encapsulation efficiency showed a trend of decline but the drug loading rate presented a rising tendency. Experimental sample group and albumin nanoparticles loading¹²⁵I marked paclitaxel group showed the same releasing drug trend basically, manifesting the sustained release of paclitaxel. The stability at room temperature and serum stability of experimental sample group and albumin nanoparticles loading ¹²⁵I marked paclitaxel group were both higher than those in¹²⁵I marked paclitaxel group (P < 0.05). From what has been discussed above, EGF coupling albumin nanoparticles loading ¹²⁵I marked paclitaxel have good drug-loading rate, drug release rate and stability.

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程

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Key words: epidermal growth factor, serum albumin, bovine, nanoparticles

中图分类号:

R318

王树斌，袁飞，彭志平，李少林，武云，朱巍. 表皮生长因子偶联牛血清白蛋白纳米粒荷载紫杉醇的制备及鉴定[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(52): 8393-8398.

Wang Shu-bin, Yuan Fei, Peng Zhi-ping, Li Shao-lin, Wu Yun, Zhu Wei. Preparation and identification of epidermal growth factor coupling bovine serum albumin nanoparticles loading paclitaxel

[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(52): 8393-8398.

图/表（结果） 1

2.1 荷载¹²⁵I标记紫杉醇表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒的载药量和包封率 表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒对¹²⁵I标记紫杉醇的包载及其载药量和包封率的测量具体数据见表1，可见荷载¹²⁵I标记紫杉醇牛血清白蛋白纳米微粒和荷载¹²⁵I标记紫杉醇表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒的包封率和载药量随着紫杉醇药量的增加，包封率呈现下降的趋势，载药量呈现上升的趋势，分别进行配对t 检验，差异无显著性意义(P > 0.05)。

2.2 荷载¹²⁵I标记紫杉醇表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒体外药物释放的测定 荷载¹²⁵I标记紫杉醇表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒的体外释药情况如表2所示，从中可以看出，荷载¹²⁵I标记紫杉醇牛血清白蛋白纳米微粒和荷载¹²⁵I标记紫杉醇表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒的趋势基本相同，表现为包载药物缓慢释放，分别进行配对t 检验，差异无显著性意义(P > 0.05)。

2.3 荷载¹²⁵I标记紫杉醇的表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒的稳定性

2.3.1 室温稳定性在室温放置1，6，12，24 h进行TLC，见表3。1 h时荷载¹²⁵I标记紫杉醇的牛血清白蛋白纳米微粒和荷载¹²⁵I标记紫杉醇的表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒测得的化学纯> 95%，6 h时略有降低(> 85%)，但差异无显著意义(P > 0.05)。采用统计软件统计分析得：同一时间点组内差异无显著性意义(P > 0.05)，在24 h内放化纯度比较差异有显著性意义(P < 0.05)，做回归分析，F 值为36.75时间与放射纯度呈线性相关，回归方程为Y=96.34-3.275X，R²为0.957(n=3)。结果显示，紫杉醇被靶向纳米粒包载后在中性pH溶液中，室温24 h内具有较好的稳定性，¹²⁵I不易脱落，较未用靶向纳米粒包载的¹²⁵I标记紫杉醇室温稳定性好。

2.3.2 血清稳定性荷载¹²⁵I标记紫杉醇的表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒在新鲜人血清中37 ℃孵育0.5，1，2，4 h，用体积分数75%乙醇展开剂纸层析法测定放射化学纯度，结果见表4。4 h放射化学纯度略有降低，与0.5 h相比差异无显著性意义(P > 0.05)。做回归分析F 值为88.37，时间与放射纯度呈线性相关，回归方程为Y=96.23-3.874X，R²为0.964(n=3)。

结果显示，荷载¹²⁵I标记紫杉醇的表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒在血清中24 h内具有较好的稳定性，¹²⁵I不易脱落。荷载¹²⁵I标记紫杉醇的表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒、荷载¹²⁵I标记紫杉醇的牛血清白蛋白纳米微粒在各个时间点的细胞摄取率都明显高于¹²⁵I标记紫杉醇组。通过方差分析，各药物组间均方MS=10.285，F=4.654，R²=0.965，P < 0.01。3组的血清稳定性有统计学差异，荷载¹²⁵I标记紫杉醇的表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒更为稳定，能够满足体内分析。

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引言

紫杉醇(paclitaxel)是临床常用的广谱抗肿瘤植物药，对于中国高发的肺癌^[1-2]、乳腺癌^[3]、食管癌^[4]、卵巢癌^[5]、宫颈癌^[6]、胃癌^[7]、淋巴瘤、子宫内膜癌、生殖组织肿瘤、膀胱癌等常见肿瘤均有明确的治疗效果。随着紫杉醇在临床上的广泛应用，其不良反应报道日益常见，并逐步引起重视。紫杉醇为白色结晶性粉末，在水中几乎不溶，可溶于甲醇、乙醇等有机溶剂。目前临床注射剂使用聚氧乙基蓖麻油和无水乙醇作为助溶剂解决了紫杉醇溶解的问题，但这些助溶剂的使用也带来很多问题^[8]。

普通紫杉醇在制备过程中^[9]，使用聚氧乙烯蓖麻油与无水乙醇(以体积比50∶50)混合作为溶媒，制成注射剂。溶剂氧乙烯蓖麻油在体内降解时会释放组胺，同时氧乙烯蓖麻油本身可以引起由补体激活所引起的急性超敏反应，初次接触抗原就可以产生酶促级联反应，导致严重的超敏反应；其可以浸出塑料输液袋装置中的增塑剂二乙基己基邻苯二甲酯，虽然临床在使用紫杉醇之前常规使用皮质激素、抗组胺药、H2受体拮抗剂等药物进行预处理，但仍经常发生超敏反应，甚至有使用者死亡的报道；聚氧乙烯蓖麻油在血循环中形成的小微粒能将紫杉醇分子包裹，阻碍了药物的作用。溶剂中的乙醇，在高剂量使用紫杉醇时有出现乙醇急性中毒的风险^[10]。

目前紫杉醇新的给药系统，如水溶性前药、脂质体、微球、乳剂、粉针、环糊精包合物、纳米粒、聚合物胶束等研究层出不穷^[11]，其中具有药物控释和缓释的剂型，微粒、微球、微胶囊、胶束和纳米粒的研究更为广泛。由于纳米载体具有控释系统的特殊性质^[12]，其药物输送方面具有许多优越性，如可缓释药物，即延长药物作用时间；提高靶向，即保证药效前提下，减少给药剂量以减轻或避免不良反应；提高药物稳定性，以利于药物在体内的分布。而且纳米载体的化学组成、形态学特点及体积差异，导致其在生物微环境下的可溶性、组织相容性和被细胞的摄取不同。

本实验采用白蛋白制备的纳米粒具有提高药物、抗体、基因等稳定性和进入细胞的能力。表皮生长因子受体参与激活一系列复杂的细胞信号转导途径，广泛表达于上皮、间质及神经组织。在许多恶性肿瘤可出现一种或几种表皮生长因子受体家族受体过表达和(或)突变，过表达和(或)突变在各种肿瘤组织中表达率不同，且与肿瘤的分化程度、恶性程度及浸润程度、放化疗敏感性、肿瘤耐药性及预后等密切相关^[13]。表皮生长因子受体家族被认为是抗肿瘤治疗的重要分子靶点^[14]。通过表皮生长因子介导增加表皮生长因子受体高表达癌细胞对表皮生长因子偶联纳米载体所载的药物、抗体、基因等的摄取，提高所载药物、抗体、基因等的靶向性。本课题研究制备高稳定性和高靶向性的纳米载体，并荷载紫杉醇药物以减小紫杉醇本身的毒性，同时达到更好的靶向性。

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材料方法

设计：样本观察实验。

时间及地点：于2012年9月至2013年4月在内蒙古包头医学院肿瘤防治研究所实验室完成。

材料：

实验方法：

牛血清白蛋白纳米微粒与表皮生长因子偶联制备表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒：采用二次超声乳化和溶剂挥发技术制备牛血清白蛋白纳米微粒，以Sulfo-NHS和EDC为催化剂，通过羧和反应连接牛血清白蛋白纳米微粒与表皮生长因子，并进行鉴定，¹²⁵I的标记均用氯胺T法，具体实验方式及结果见作者既往研究的相关文献^[15]。

表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒荷载紫杉醇的制备：取表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒悬浊液 1 mL，以1 mL丙酮溶解800 mg紫杉醇(紫杉醇分子量 853.906 g/mol)，然后混合这两种有机溶液。将混合有机溶液加入到2%聚乙烯醇水溶液40 mL中，冰浴条件下使用B3200S-T超声波细胞破碎机超声处理2 min，形成乳液。37 ℃水浴搅拌(400 r/min)挥发有机溶剂，然后用高速离心机20 000 r/min离心10 min，收集沉淀。

主要观察指标：

表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒对紫杉醇的包载及其载药量和包封率的测量：将10 mL表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒和牛血清白蛋白纳米微粒加入10 mL质量浓度分别为100，200，400，800 mg/L的¹²⁵I标记紫杉醇(丙酮)溶液中进行载药(实验所进行¹²⁵I放射性核素标记均采用氯胺T法)。各组取1 mL测定总放射性计数(cpm)，然后加入10%三氯乙酸1 mL沉淀蛋白，测定沉淀的放射性计数(cpm)，经计算得到表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒对紫杉醇的包封率和载药量。

表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒荷载紫杉醇的体外药物释放测定：将荷载200 mg/L紫杉醇的表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒采用柱层析进行分离纯化后，各取10 mL溶液，放于37 ℃恒温振荡，于10 min、20 min、40 min、1 h、2 h、4 h、8 h、24 h、48 h各取出1 mL测定总放射性计数，然后加入10%三氯乙酸10 mL沉淀蛋白，测定沉淀的放射性计数，计算不同时间点的药物释放率，绘制药物释放曲线。

荷载¹²⁵I标记紫杉醇-表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒的稳定性：①室温稳定性：取500 µL表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒荷载¹²⁵I标记紫杉醇(200 mg/L)、牛血清白蛋白纳米微粒荷载¹²⁵I标记紫杉醇和¹²⁵I标记紫杉醇，分别室温放置1，6，12，24 h，纸色谱层析(paper chromatography，PC)测定放射化学纯度，在每个时间点吸取20 µL溶液点样，流动相为体积分数75%乙醇，测定cpm，计算各时间点的放射化学纯度，并与第一个时间点(5 min)的放射化学纯度(radiochemical purity，RCP)进行比较。②血清稳定性：将500 µL纯化的表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒荷载¹²⁵I标记紫杉醇，牛血清白蛋白纳米微粒荷载紫¹²⁵I标记紫杉醇和¹²⁵I标记紫杉醇分别加入2倍体积新鲜人血清中，37 ℃分别孵育0.5，1，2，4 h，纸色谱层析(paper chromatography，PC)测定放射化学纯度，在每个时间点吸取20 µL溶液点样，流动相为体积分数75%乙醇，测定cpm，计算各时间点的放射化学纯度。

统计学分析：计量资料用x(_)±s表示。采用SPSS 11.5软件进行方差分析，t 检验，P < 0.05为差异有显著性意义。

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讨论

化疗是肿瘤治疗的重要手段，传统化疗药物虽然能够有效杀灭肿瘤，但由于选择性差，而损伤正常器官，引起相关的不良反应^[16]。紫杉醇因其具有结构新颖、作用机制独特、抗癌效果显著、抗癌谱广等特点，目前在临床上为一线抗癌药物广泛应用于乳腺癌、肺癌、卵巢癌等的治疗。普通紫杉醇是使用聚氧乙稀蔑麻油和无水乙醇以体积比为1∶1比例混合作为溶剂，溶解紫杉醇制备而得注射液，溶剂提高了紫杉醇的溶解度，使不溶于水的紫杉醇可用于静脉滴注给药，提高药物的利用效率。紫杉醇在临床使用中常有过敏反应、中性粒细胞减少症、骨髓抑制等不良反应，且紫杉醇稳定性和水溶性较差，进一步研究有较低毒副作用、较好水溶性与较强靶向性，并且对多药耐药细胞具有较强活性的紫杉醇类药物一直是国内外的研究热点^[17-20]。

目前紫杉醇的载体种类繁多，常见的有脂质体、血清蛋白、脂肪族聚酯类聚合物如聚乳酸(polylactide, polylactic acid，PLA)、乳酸-羟基乙酸共聚物[poly (lactic- co-gly-colic acid)，PLGA]、羟丙基-β-环糊精、生物降解材料等。脂质体由磷脂和胆固醇组成，结构上类似生物细胞膜双分子层，由于磷脂为双亲性物质，所以脂质体既可包载亲水性药物也可包载疏水性药物，且脂质体生物相容性好，生物可降解，具有缓释和被动靶向性^[21]。但脂质体贮存过程中药物容易泄露，以及脂质容易氧化等导致稳定差、保质期短、生产工艺成本较高、价格昂贵等问题。目前研究的紫杉醇载体给药系统，选择合适的载体是目前研究的热点，理想的载体应具备以下特点^[22-24]：具有溶解或包载化疗药物的能力；能避免网状内皮细胞的吞噬，在血液循环中载体保持稳定，且在到达肿瘤部位前药物能保持自身活性；能穿透肿瘤细胞外基质等各种生理屏障，到达肿瘤干细胞；迅速被肿瘤细胞摄取，在肿瘤细胞内释放药物。

牛血清白蛋白纳米载体具有良好的储存稳定性和更高的亲水性药物负载能力，并且调节降解速率可控制所载药物或基因的释放，可在体内代谢分解为相对分子质量小于50 000的可溶性碎片，经过尿液或者胆汁排泄清除，所以是一种理想的药物载体^[25-27]。作者所在的研究小组已成功制备了平均粒径为38 nm的表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒。本实验通过纳米载体对紫杉醇进行修饰，改善紫杉醇的理化性质，并利用表皮生长因子与细胞膜上高表达的表皮生长因子受体结合，有效地将包载紫杉醇运送到肿瘤细胞，以提高肿瘤细胞对紫杉醇的摄取量。

纳米载体在体内的分布与其颗粒大小紧密相关^[28-31]，粒径较大的(>500 nm) 静脉给药后不易通过肺部毛细血管网，在肺部被毛细血管机械性截滤，因此在肺脏的分布最多；动脉给药则易阻滞于肝、肾的毛细血管床。纳米载体(粒径在200-500 nm)不易被毛细血管网截滤，可到达体内各个部位，但进入体循环后易被单核巨噬系统所吞噬，因此主要分布在肝、脾和骨髓等单核巨噬系统所分布的器官。纳米载体粒径大于100 nm时虽然有较好的靶向性，但在体内循环较慢，较易被网状内皮系统的巨噬细胞内吞转运到肝枯否细胞溶酶体中。纳米粒如果过小则容易渗出毛细血管，所以纳米粒粒径在30-100 nm时各项理化、生物学性能比较优越，当其进人体循环后，可以避开肝脏等单核巨噬系统的摄取，而较长时间存在于体循环中或转运至其他组织或器官。尤其是粒径在30-50 nm时，能穿过肝脏内皮和淋巴管内皮更易于到达骨髓。本实验所采用的牛血清白蛋白纳米微粒具有理想的粒径，荷载药物后，在体内的分布可能会有更加优秀的药代动力学特点。由于表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒荷载紫杉醇超小的体积，可顺利通过微循环异常的肿瘤血管内皮层，从而在局部长期缓慢地释放所携带的药物，使局部达到持续有效药物浓度，同时可避免全身不良反应。

利用白蛋白作为人体疏水性分子自然载体的生物特性，增加了紫杉醇在肿瘤细胞中的分布，因此不必使用合成的溶剂^[32]。白蛋白结合型紫杉醇中的白蛋白部分与与血管内皮细胞膜表面的特异的白蛋白细胞表面受体(gp60)结合^[33]，激活细胞膜囊泡的主要成分窖蛋白1，导致受体介导的白蛋白药物复合体进入细胞膜穴样凹陷，随后完成跨膜转运，药物进入肿瘤细胞。

表皮生长因子受体在调节细胞生长和组织修复中起十分重要的作用^[34-37]，与肿瘤细胞的增殖、肿瘤血管生成、黏附、侵袭、转移和肿瘤细胞的凋亡等密切相关。表皮生长因子受体与配体结合后形成二聚体，导致酪氨酸激酶活化和受体自身磷酸化，后通过多种信号转导途径,促进了细胞的分化、迁移和血管生成，最终抑制细胞的凋亡。靶向药物已在临床广泛应用，针对于将靶向药物与传统化疗药物联合，国内外大量的基础研究提示二者联合能够产生协同增效作用，可能成为肿瘤治疗很有希望的发展方向。靶向治疗一般都以肿瘤细胞表面高表达的分子作为靶向分子。理想的靶向分子应该在所有肿瘤细胞表达而不在宿主正常细胞表达，同时不能有突变或变种，以保证细胞存活以维持细胞的正常功能。本实验采用表皮生长因子受体为靶分子，通过将白蛋白纳米载体将紫杉醇更多的集中在表皮生长因子受体高表达的肿瘤细胞周围，进一步提高紫杉醇对肿瘤细胞的杀伤力，减少其他器官的药物反应。

牛血清白蛋白本身具有良好的理化性质^[38-39]，同时由于其理想的粒径和良好的稳定性，所制成的表皮生长因子靶向纳米载体具有纳米载体的一般性质的同时，在靶向性方面又明显优于普通纳米载体，本课题对紫杉醇进行了荷载和相关理化性质的鉴定，认为表皮生长因子-牛血清白蛋白纳米微粒对紫杉醇来说是一个稳定，可靠的载体。

本研究成功使用表皮生长因子偶联牛血清白蛋白纳米粒荷载紫杉醇，为进一步探讨其体外肿瘤细胞靶向性及体内分布规律奠定了实验基础。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料；骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性；组织工程
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表皮生长因子偶联牛血清白蛋白纳米粒荷载紫杉醇的制备及鉴定

Preparation and identification of epidermal growth factor coupling bovine serum albumin nanoparticles loading paclitaxel

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